酶标记抗原对流免疫电泳技术
抗原对流免疫电泳电泳的原理酶标记抗原对流免疫电泳时,将酶标记抗原代替未标记抗原,在碱性条件下,凝胶内酶标记抗原向正极移动,抗体在内渗液流作用下慢慢向负极移动,然后形成酶标记抗原-抗体免疫复合物,最后用底物显色。
酶标记抗原对流免疫电泳程序(检测血吸虫病)
1, 抗原血吸虫卵蛋白质纯化
2, 酶标记抗原(血吸虫卵蛋白质)
3, 酶标记抗原对流免疫电泳
(1)器材与设备
(2)器材与试剂:酶标虫卵抗原溶液;健,病兔血清或健,病人血清;底物溶液:先配成饱和联苯胺溶液,然后用等量0.01mol/l ph 7.6硼酸缓冲液稀释,在临用前加入h2o2,使h2o2终浓度为0.01%。
(3)实验程序:
按常规方法进行对流免疫电泳与漂洗。
在底物与供氢体溶液中,室温(20-25℃)反应3h。
观察和记录。
讨论酶标记虫卵抗原保存时间以1个月内为宜。制备了酶标抗体,也可以用该法检测相应的抗原。
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